細胞名(ming)稱：
SK-NEP-1 人腎母(mu)細(xi)胞瘤細(xi)胞
半貼壁，不規則型細胞
編號：
352207 產品形式：
2mL 凍(dong)存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶 ；
安(an)全等級(ji)：
一級，安全柜或超凈臺操(cao)作
收貨須知：收貨當天發現異常，請(qing)在 24 小時(shi)內及時(shi)聯系客服，逾期(qi)視(shi)為收貨良好；凍存管形式，收貨后(hou)及時(shi)置于-80℃冰(bing)箱保存，若 長時間不使用，應過(guo)夜轉移至液氮保藏(zang)；T25 形式，收貨后(hou)(hou)先培(pei)養(yang)瓶原裝置于培(pei)養(yang)箱靜(jing)養(yang) 4h，然后(hou)(hou)再對細胞進行常規操作(zuo)。復蘇(su)時每 管一次用(yong)完不(bu)(bu)得(de)留存，復蘇(su)后(hou)傳一代，即(ji)可正常(chang)使(shi)用(yong)。請嚴格按(an)照本(ben)說明(ming)操作，否則造(zao)成細(xi)胞失活等情形，不(bu)(bu)予提供補(bu)發服務。
培養條件：
37℃，5%CO2，CM24-1 培(pei)養(yang)液。CM5-1 培(pei)養(yang)液：85%McCoy’s 5a+15%FBS。McCoy’s 5a：MC’5A 培(pei)養(yang)基，含谷氨酰胺。
復蘇步驟：
①新(xin)制 100mm 平皿 1 個，含 12mL 上述培養(yang)液(ye)；②凍(dong)存管(guan)從液(ye)氮(dan)或-80℃中(zhong)取出，37℃水浴 1~2min,待(dai)*溶解后(hou)盡快移(yi)入(ru) 安全柜復蘇；③用無菌吸管吸取溶解液打(da)入新制平皿(min)中，順時針搖勻；④放入（37℃，5%CO2）培養箱中(zhong)，過(guo)夜換液，3-5 天長滿。
傳代/凍存：
將舊培養液吸除(chu)，PBS 清(qing)洗兩遍后，無需使用胰酶(mei)消化，直接加入 12mL（/100mm 皿）培養液，用吸管吹打細胞至*脫(tuo) 落，輕(qing)輕(qing)吹打均(jun)勻(yun)，可分(fen) 3~6 皿培養；凍存則(ze)將(jiang)細胞(bao)轉移至離(li)心管中，(110g，3min)離(li)心，離(li)心完成后用 6mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO） 重(zhong)懸細胞，吹(chui)打(da)均勻，分為 6 支(zhi)凍存(cun)管，用程(cheng)序(xu)降溫盒于-80℃凍存(cun)。
復(fu)蘇質量記錄：
根據(ju)復蘇要求，對以上細胞株進(jin)行復蘇，記錄結果(guo)如(ru)下(xia)：
項目 質量標準 復蘇(su)記錄
復活性： 12h 貼(tie)壁，86h 長滿 80% 過(guo)夜 18h 后觀察(cha)貼壁(bi)，96h 密度達 80% 細胞形態： 半貼壁(bi)，不規則型細胞 CM24-1 培(pei)養液中，半貼(tie)壁，不規則型(xing)，有(you)圓形、短梭性 附圖： 結論(lun)： 復活性好(hao)，且細胞形態無異常(chang)，合(he)格
