細胞基質(zhi)金(jin)屬蛋白酶（MMP-2）活性比色法定(ding)量檢測試劑(ji)盒產品說明書（中(zhong)文版） 主要(yao)用途 細(xi)細(xi)胞基質金屬蛋白(bai)酶(mei)（MMP-2）活性比色法定(ding)量檢測試劑盒是(shi)一種旨在通過含(han)硫多肽(tai)底物以及特定(ding)抑(yi) 制劑存在與否的情況(kuang)下，受到 MMP2 的水解，釋(shi)放(fang)出巰(qiu)基，進(jin)而使用 Ellman 試劑(ji)，產(chan)生(sheng)黃色 5-巰(qiu)基-2-硝 基苯(ben)甲酸產(chan)物吸光峰(feng)值的(de)(de)(de)變化，即采用比色法(fa)來測定細胞裂解樣品(pin)中酶活(huo)性的(de)(de)(de)而經(jing)典的(de)(de)(de)技術方法(fa)。該 技術經過精心研制、成功實驗證明的。其(qi)適用于各種(zhong)細胞裂解萃取(qu)液樣品（動(dong)物、人體(ti)）、部分或純化 酶樣品中基質(zhi)金屬蛋白酶 2 的特(te)異活性定量檢測，以及抑制劑(ji)和激活劑(ji)的篩選。產品(pin)嚴格(ge)無菌(jun)，即到即用， 操(cao)作簡捷，性(xing)能穩定，安(an)全可靠。 技術背景 細胞(bao)基質金屬蛋(dan)白(bai)酶（MMP-2）活性比色法定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試劑是一(yi)類(lei)結構(gou)高度同源的分泌型或(huo)膜相(xiang)關(guan)性鋅內肽 酶的總稱(cheng)，因含有(you)金屬（鋅、鈣）離子而(er)得名(ming)。其功能在于(yu)分解細胞(bao)外基(ji)質成(cheng)分。迄今為(wei)止發現的MMPs 至(zhi)少有28種，幾乎(hu)能降解除多糖以外的全(quan)部細胞外基(ji)質(zhi)（extracellular matrix）成分，同(tong)時(shi)參與胚胎發育、 形(xing)態(tai)形(xing)成、胚泡植入（blastocyst）、血(xue)管形成、組(zu)織再吸收(shou)（tissue resorption）、疾病發生，例如關節炎、癌 細胞浸入轉移等。根據降解的(de)底物不同可將(jiang)MMPs分為4大類：（1）膠原(yuan)酶：MMP1、MMP8、MMP13主要 消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠(jiao)原和蛋白多(duo)糖(tang)；（2）明膠(jiao)酶（Ⅳ型膠(jiao)原酶）：MMP2、MMP9，又稱(cheng)明(ming)膠酶A、 B，主要(yao)消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈(dan)性纖(xian)維；（3）基(ji)質溶解(jie)素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、 MMP12，主要作用(yong)于纖維(wei)粘(zhan)連(lian)蛋白、層粘(zhan)連(lian)蛋白、彈力纖維(wei)、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及(ji)MMP1、MMP8、 MMP9；（4）膜(mo)型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠(jiao)、Ⅳ型膠(jiao)原、MMP2。 體(ti)內絕大多數細胞并不儲備(bei)MMPs，當需(xu)要(yao)MMPs的信號傳(chuan)遞到細胞后(hou)才(cai)臨時合成，合成的MMPs以(yi)無(wu)活性 的酶(mei)原（proenzyme）形式分泌(mi)到細(xi)胞外(wai)，隨后被多種蛋(dan)白(bai)(bai)酶(mei)和非蛋(dan)白(bai)(bai)酶(mei)水解(jie)以及熱處理激活，一種激活的 MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布(bu)效應(ying)。基質金屬蛋(dan)白酶-2，又稱明膠酶(mei)A （gelatinase-A）或IV型膠原 酶(mei)（type IV collagenase），其前體(ti)分子量(liang)為72kDa，激活后分(fen)子量為62和(he)56 kDa。它在血清(qing)或細胞上清(qing)中濃(nong) 度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標是天然和(he)變(bian)性(xing)膠原蛋白（collagens）、纖維連接(jie)蛋(dan)白（fibronectin）、 彈性纖(xian)維蛋(dan)白（elastin）、層粘(zhan)連蛋(dan)白-5 （laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經（蛋(dan) 白(bai)）聚(ju)糖（neurocan）。基質金屬蛋白酶(mei)-2與腫(zhong)瘤發展與轉移(yi)、血管形成、動脈(mo)粥樣(yang)硬化等疾病有關。基于 含硫多(duo)肽（thiopeptide）底物(wu)Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在(zai)特異(yi)性抑制劑OA-Hy 存在(zai)與否(fou)的(de)條(tiao)件下，受到(dao)MMP2的水解(jie)，釋放(fang)出巰基（sulfhydryl group），進而與Ellman試劑5,5-二(er)硫基-雙 （2-硝基(ji)苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoic acid）；DTNB]反(fan)應后，產生黃色(se)的5-巰基-2-硝(xiao)基苯甲酸 （5-thio-2-nitrobenzoic acid；TNB），通(tong)過其吸(xi)收(shou)峰值(zhi)的變化(hua)（412nm波長），來(lai)定量測定細胞基質(zhi)金屬(shu)蛋 白酶2的特(te)異活性。基質金(jin)屬蛋白酶2反應系統為： 產品(pin)內(nei)容 清理(li)液（Reagent A） 毫升 裂(lie)解(jie)液（Reagent B） 毫升 緩(huan)沖液（Reagent C） 毫升 反應液(ye)（Reagent D） 毫升(sheng)
